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  3. 如何閱讀凝膠電泳

    凝膠電泳是實驗室中用于分離DNA(脫氧核糖核酸)的方法。它也可以用于分離RNA和蛋白質。

    讀取凝膠電泳結果可讓研究人員確定樣品中鏈的大小。要了解該過程的工作原理,**先**學習凝膠電泳的定義。

    凝膠電泳定義

    凝膠電泳是分子生物學中用于確定DNA,RNA和蛋白質的大小和電荷的強大工具。您**先要使用被較大的DNA鏈中的酶消化的DNA片段。

    使用凝膠電泳帶強度作為結果,您可以算出片段的大小。然后可以獲取DNA指紋。

    正如單詞的“電”部分所揭示的,凝膠電泳定義需要使用電場。使用一種特殊的機器,該機器包含覆蓋電極的緩沖溶液,凝膠懸浮在內部的孔以及電極本身。

    凝膠電泳中的凝膠

    凝膠電泳儀需要使用形成為平板的凝膠,該凝膠通常由純化后的海藻瓊脂糖瓊脂糖制成。

    瓊脂糖凝膠制成多孔基質,各種大小的帶電分子可以通過多孔基質以不同的速度傳播。在將凝膠倒入模具之前,將一種稱為溴化乙錠(EtBr)的化學物質添加到凝膠溶液中。

    如果要分離的DNA或蛋白質分子很小,則可能需要使用聚丙烯酰胺凝膠代替瓊脂糖。使用聚丙烯酰胺時請多加注意,因為它具有神經毒性。

    將特殊的梳子放在瓊脂糖凝膠模具中,然后在固化后小心地取出。**先將DNA片段或其他分子樣品與一種特殊的上樣染料混合后放在此處。該樣染料只是跟蹤DNA的運動,因為它是不可見的,否則。

    還有一個包含所謂的DNA梯子或標記物的孔。這可作為具有已知條帶大小的高質量模板,用于與正在研究的DNA樣品進行大小比較。一旦施加電場,這些帶負電荷的分子將通過凝膠朝著正極行進。

    凝膠電泳結果

    一旦分子行進到凝膠末端,就該讀取凝膠電泳結果了。凝膠中的EtBr染料很容易與DNA結合,因此可以使用,然后您可以在紫外線下看到DNA熒光帶。

    您**格外小心,不要觸摸溴化乙錠,因為它與DNA的親和力也意味著它可以放松。因此,它被認為是誘變劑。盡管價格更高,但現在可以使用更新,更安全的染料。

    紫外線揭示了DNA或其他分子樣品的凝膠電泳帶強度。條帶在凝膠上的位置揭示了DNA片段的大小。的凝膠電泳條帶強度揭示了分子的濃度。

    現在,您可以將樣品中的DNA條帶與DNA階梯樣品進行比較。梯子的已知條帶大小將幫助您確定正在研究的DNA的相對大小。

    **凝膠電泳的重要性

    凝膠電泳儀已用于DNA指紋和法醫。它已幫助研究人員確定有關許多物種基因組的信息。對于這些重要**域,使用高質量的凝膠電泳結果至關重要。

    因此,使用高質量的成分并在制作凝膠時要格外小心是至關重要的。防止DNA樣品被RNA或蛋白質污染至關重要。

    確保使用清潔的緩沖液,小心地倒入凝膠,以使其梳孔均勻形成,并使所有試劑保持在適當的溫度下。凝膠電泳帶的強度應充滿活力且清潔,背景中無任何其他DNA的痕跡,并且RNA或蛋白質的涂片也不會污染凝膠。


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